查士丁一世
518年，禁衛軍首領查士丁即皇帝位，指定其侄子查士丁尼一世爲繼位人。
527年，查士丁尼一世被授予奧古斯都尊號，與叔父查士丁共同執政。
527年8月，查士丁去世，查士丁尼一世(527-565年在位)成爲東羅馬帝國唯一的皇帝。
查士丁尼一世
6世紀時，拜佔廷帝國有東方、色雷斯和伊利里亞三大軍區。528年，設立了亞美尼亞軍區;537年，又設立了海上軍區。邊防軍士兵從政府那裏領取農田，自己耕種或僱人耕種，提供自給自足的軍糧。邊防軍和野戰軍的最基層單位爲隊，每隊5人;兩隊爲一連;10連爲一營;6營爲一團;3至4團爲一師;3至4師組成一個軍團。
查士丁尼在世時，共完成三部法律彙編。即《查士丁尼法典》、《查士丁尼法學總論》、《查士丁尼學說彙纂》;其死後法學家又完成了《查士丁尼新敕》("新律")。這四部法律統稱爲《查士丁尼國法大全》(又譯民法大全)，又稱查士丁尼法典。《國法大全》是羅馬法發展史上的集大成之作，其出臺是對羅馬法1000年來發展的歸納和總結，無論是對羅馬法體系還是對其他法律體系，無論對當時還是後世，都有着非常重要的意義。 查士丁尼法典的頒佈標誌着羅馬法發展到完備階段，他保留了羅馬法在法學方面的創造性成果，對人們的行爲作出法律規範爲複雜的社會矛盾的調節提供了法律手段。它也對後世資本主義國家的法律制定起到了藍本作用，近代西歐多數國家在制定法令時都將該法典作爲參考。
532年，尼卡暴動。在賽車會上，藍黨、綠黨兩黨下層因對官吏橫暴和苛稅不滿，要求罷免特里博尼安和卡帕多西亞的約翰兩個暴吏，釋放兩黨被囚禁成員。遭拒絕後爆發了聲勢浩大的起義，起義羣衆搗毀監獄，焚燒官邸。大火持續3天，焚燬了聖索菲亞大教堂等公共建築物，並蔓及皇宮。查士丁尼一世撤換兩個寵臣後，親赴賽車場說服起義者，未能奏效。訓練有素的政府軍節節敗退，全城除皇宮外均被起義者控制。關鍵時刻，皇后狄奧多拉阻止丈夫查士丁尼一世逃離首都。隨後，查士丁尼一世施展陰謀，一面派貝利薩留組織蠻族僱傭軍，一面派人收買藍黨。起義第八天，藍黨突然倒戈，起義軍陣腳頓亂。蠻族僱傭軍屠殺起義羣衆約3萬餘人。在皇后狄奧多拉要求下，綠黨領袖希巴提烏斯及其家族也被誅殺殆盡。查士丁尼的鎮壓改變了羅馬公民參與政治的傳統，甚至連賽車這種傳統體育活動後來也被逐漸取消了。
532年-537年，查士丁尼一世重修並擴建"聖索菲亞大教堂"。 這座教堂後來成爲拜占庭宗教生活和東正教的中心。
553年，查士丁尼一世爲緩和東正教與一性派之間矛盾，主持了東正教和一性派主教的聯合會議。
533年，查士丁尼一世集中兵力向西發動戰爭。
534年，查士丁尼一世派貝利薩留滅汪達爾-阿蘭王國，兼併北非，佔領撒丁島和科西嘉島。查士丁尼爲統治被征服的領土，在迦太基設立阿非利加長官府和督軍署。查士丁尼把被汪達爾人侵佔的土地發還給當地居民和天主教會。爲了慶祝國土的光復，君士坦丁堡爲貝利薩留舉行盛大的凱旋儀式。
535年，查士丁尼一世侵入東哥特王國，遭到猛烈抵抗。
541年，波斯軍隊又從北方侵入拉齊卡地區。查士丁尼再次任命貝利薩留指揮東方戰場，進行一系列反擊。雙方約在561年底媾和，簽訂爲期50年的和約。
542年春天，大瘟疫給拜占庭帝國造成了第一次毀滅性打擊，瘟疫起自尼羅河沼地，毀滅了帝國三分之一的人口，僅在君士坦丁堡，就有逾半數居民死亡。秋天，瘟疫消失了，然而在此後70年裏又多次捲土重來，毀掉了東羅馬帝國賦稅和兵員來源，使東羅馬帝國貨幣處於崩潰邊緣，而領土喪失也很快導致了君士坦丁堡糧食供應減少。
552年，查士丁尼一世出兵干涉西哥特王國，佔領西班牙東南部。
554年，東哥特王國最終被查士丁尼一世派兵滅亡。
查士丁二世
565年，查士丁二世(狄奧多拉侄女婿兼養子)繼位。
568年，倫巴第人從北方翻越阿爾卑斯山，入侵亞平寧半島，建立倫巴第大公國(568-774年)。查士丁二世不得不放棄了意大利北部和東部地區。此後拜占庭又遭阿瓦爾人入侵。
571年，查士丁二世和突厥聯合和波斯再起戰端。但在敘利亞大敗於波斯庫斯魯一世(庫思老一世)。
572年，倫巴第人定都帕維亞。東羅馬帝國只保留拉文納一帶狹長的地帶。
574年，查士丁二世不得不退休，以養子提比略二世爲凱撒(副皇帝)。
提比略二世
578年，提比略二世繼位。提比留以查士丁一世侄孫之岳父這點親戚關係，得以繼續維持查士丁尼王朝世系。
莫里斯一世
582年，莫里斯一世(582-602年，提比略二世女婿)繼位。
590~604年，教皇格列高利一世在位，認爲教皇是上帝指派的全部教會的首腦，將教皇的影響擴大到自己的轄區以外。
591年，莫里斯一世干涉波斯內亂，白赫蘭·楚賓的軍隊在經過兩次激烈戰鬥後被徹底擊潰，他本人則走投無路，最後幾經輾轉進入了突厥人領地。庫思老二世重新入駐泰西封。
594至600年，得益於能幹的普里斯庫斯將軍卓越領導，拜占庭帝國軍隊不但成功遏制住阿瓦爾人南進步伐，還難得地在與草原蠻族較量中佔據上風，這還自查士丁尼一世皇帝晚年以來第一次。
601年，拜占庭帝國與阿瓦爾人在蒂薩河岸進行最後決戰，伯顏可汗徹底戰敗，喪失了4個兒子和近3萬人軍隊。於是，羅馬人自3世紀撤出達契亞以來，第一次再度踏上多瑙河下游北岸的匈牙利土地。這次大捷後，普里斯庫斯將軍或許是由於功勳過於顯赫，招致了莫里斯一世嫉恨，不久神祕死去。
福卡斯
602年，普里斯庫斯將軍部下福卡斯率軍出征多瑙河流域的阿瓦爾人，到了多瑙河後，福卡斯率軍譁變，轉而南下返回首都，發動政變，殺了莫里斯一世皇帝，即位爲皇帝。並在首都大肆屠殺反對者。
604年，莫里斯一世女婿庫思老二世親自率兵出征，隨軍帶有一名自稱莫里斯皇帝之子狄奧多西的傀儡，奪取亞美尼亞、兩河流域和敘利亞大片地區。面對各地反抗，福卡斯皇帝只能採用殘酷殺戮來對付帝國名門貴族，結果殺人越多，敵人也越多。當時帝國時局可以說已經達到了最壞的境地。
606年，波斯庫斯老二世趁拜占庭內亂，再次入侵。
608年，拜占庭北非總督希拉剋略起兵反對福卡斯，內戰爆發。福卡斯派東方總督前去討伐希拉剋略，但被希拉剋略之子尼斯塔斯擊敗，而波斯也趁拜占庭東方部隊前往埃及之機，攻陷了敘利亞和美索不達米亞的大部分東方行省，並深入安納托利亞半島。
610年，希拉剋略大軍抵達君士坦丁堡城下，福卡斯城防部隊和希拉剋略通絡，希拉剋略未經抵抗便佔領了首都，抓獲並砍了福卡斯的腦袋。希拉剋略登基，由此開始了拜占庭希拉剋略王朝。
